微生物技能考核标准

时间：2022-03-03 14:24:08 来源：网友投稿

显微镜的使用与维护班级：
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一、实操部分（80分）
序号内容评分标准分值得分 1 准备（满分10分）
材料准备充分，中途不得取用非操作台材料 5 显微镜取用姿势准确，安放位置合理 5 2 低倍镜使用（满分25分）
插上电源，打开光源，用拇指和中指移动旋转器（切忌手持物镜移动 5 使低倍镜对准镜台的通光孔，放置载玻片，标本中间对准通光孔，并用压片夹夹好 5 调节焦距，从一侧看着向上调节载物台，粗准焦螺旋调节物镜与载物台至最小距离处 5 双眼视目镜，调节粗准焦螺旋至有模糊的像，然后调节细准焦螺旋至清晰的像，二者不得来回交替使用，且光线强弱适宜（2分）。

10 3 高倍镜使用（满分10分）
将观察对象调至视野中央，转动转换器至高倍镜，防止撞到玻片 5 调节细准焦螺旋至清晰的像，光线调节至强弱适宜 10 4 油镜的使用（15分）
转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片的距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。

5 如果不出现物象或者目标不理想要重找，在加油区之外重找时应按：低倍→高倍→油镜程序。在加油区内重找应按：低倍→油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜头（3分），至调出清晰的像。

10 擦拭目镜和物镜上的油污，擦镜纸、二甲苯、(0.5)擦拭方法均要正确(1) 15 取下玻片，拔下电源，关上开关，载物台调至最大距离处，物镜八字摆开，罩上防尘罩，并认真填写使用记录。

5 5 计时不得超过5分钟，超过者倒扣分，最多扣5分简单染色评分标准班级：
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序号考核项目评分要素配分评分标准检验结果得分备注 1 准备（10分）
着装整洁；
实验用物齐全适用，放置合理 10 少选多选1件扣5分 2 制片（40分）
无菌操作取菌 20 无菌操作正确规范，错1处扣5分，涂片区域圆形，直径1cm左右 3 干燥固定 5 不可过热、固定操作的规范性，错1处扣2分 4 染色、水洗 15 染液滴加的量；
染色时间，水洗操作的规范性，错1处扣5分 5 镜检（35分）
显微镜的预备 5 显微镜的检查；
正确放置打开光源，光路对准，错1处扣2分 6 涂片镜检 10 低倍到高倍，到油镜，物镜的转换；
物象调节，错1处扣2分 7 镜检结果 15 菌体分布均匀，密度合适，明暗合适，对比度合适。错1处扣3分 8 显微镜的整理 5 镜头的擦拭；
物镜的“八字形”转换；
将载物台降到最低，错1处扣2分 9 其他（5分）
清理用物，环境卫生 5 清扫实验台及收拾产生垃圾，少1环节扣1分 10 时间（10分）
操作时间 15 要求10分钟内完成，每超过1分钟，扣5分。

总分制备无菌平板评分标准（时间5分钟）
班级：
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项目考核内容分值评分细则扣分备注得分准备 ( 10分) 物品准备、摆放及酒精擦拭 8 物品摆放合理、酒精擦手正确，材料准备齐全，得8分中途不得取用任何物品，取1次扣4分摆放的物品影响操作，扣2分取菌前未用酒精擦拭，扣2分贴标签（培养皿）
2 贴标签且位置合理，得2分每漏贴一个，扣1分每错贴一个，扣1分三角瓶操作（15）
开塞、瓶口灭菌、持法、盖塞 15 三角瓶操作正确，得15分未灼烧，开塞不正确，塞子放置不正确，均扣5分盖塞前瓶口和塞子不灼烧，均扣5分三角瓶的瓶口开口处位置不对，扣5分以上几项合计最多扣15分倒平板（40分）
加培养基（培养皿持法、加入量、污染皿壁、混匀、）
40 正确（单手持皿，平端，两指自如开合皿盖，另一只手持培养基瓶），平板效果优秀，得40分培养基温度不适宜，皿盖上方水汽过多，扣5分平板未铺全或高于培养皿高的2/3，一个扣5分，培养基污染皿壁，一个扣10分三角瓶口接触平皿，一个扣5分培养基倾斜，一个扣5分培养基有凝块、不透明，一个扣5分无菌操作（15）
酒精灯附近区操作 15 在酒精灯无菌区操作，得15分所有开口处均应在酒精灯无菌区，出无菌区1次扣5分操作情况（10分）
操作熟练程度 10 熟练，得10分较熟练，得8分一般，得6分不熟练，得0分无菌检查（10分）
培养48h，有无微生物生长 10 无杂菌生长，且平板无开裂，无干枯部位，得10分培养皿有杂菌，每个扣5分平板开裂，共扣5分平板干枯，共扣5分血球计数板计数（时间：30min）
班级：
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学号：
项目考核内容分值考核记录（以"√"表示）
备注得分准备（3分）
物品摆放及酒精擦手 0.5 物品摆放合理、酒精擦手正确，得0.5分摆放的物品影响操作，扣0.5分取菌前未用酒精擦手，扣0.5分显微镜的取用 0.5 显微镜的取用与摆放方式准确，得0.5分取用与摆放方式不正确，扣0.5分血球计数板的放置与检查 1 正确放置血球计数板于载物台上，得1分没用压片夹夹住，扣0.5分没有放在计数区内，扣0.5分 1 进行检查或经清洗后确定清洁，得1分没有进行检查扣1分清洗后干燥方法不合理，扣1分加样（2分）
添加酵母菌悬液于血球计数板上 2 能够正确添加酵母菌悬液2分加样前未摇匀菌悬液扣1分未用滤纸吸除多余菌液扣0.5分盖好玻片后有气泡扣1.5分显微镜调节（3分）
调整显微镜找到血球计数板上计数网格 3 40倍镜下找到最左上角的大网格，并将显微镜调清晰，给监考老师看，得3分未从低倍到高倍转换，扣0.5分未给监考老师看扣2.5分未找到最左上角的大网格扣2分找到最左上角的大网格但不清晰扣1分。

计数（2分）
准确计数，并写出原始数据 2分准确计数，并写出原始数据，得2分没有原始数据，扣2分数据不准确，扣1分原始数据不合理，扣1分计算，报告（6分）
计算公式、过程 4 准确计算，得出菌悬液浓度，得4分数据处理过程不正确，扣4分数据处理结果不正确，扣4分数据不合理，扣1分报告结果规范、正确 2 报告清楚、准确、无涂改，得2分结果报告不准确，扣0.5分报告填写每改1次，扣0.5分清洗（2分）
血球计数板清洗，归位 2 血球计数板清洗，并干燥归位2分清洗方法不正确，扣1分干燥方法不合理，扣1分未将血球计数板归位，扣1分文明操作（2分）
实验后台面整理，设备归位 2 整理，得2分显微镜未整理，扣1分台面未整理，扣1分血球计数板损坏，扣2分盖玻片损坏，扣0.5分完成时间 (0分) 共用（　　　　　）分钟开始：　　　　　结束：　　　　　 0 提前，不加分不扣分按时，不加分不扣分超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）
合计平板划线分离考核标准班级：
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序号项目内容满分(100分) 评分细则扣分总分 1 实验前的准备准备全所需的所有实验材料 15分 3 材料准备充分，中途取用物品扣3分　　贴标签 4 未贴扣4分，贴错扣2分；
信息不完整扣2分酒精棉球擦拭手与工作台面 4分未擦拭扣4分擦手不彻底最多 2分擦台面不彻底最多2分接种针的灼烧是否彻底，拿法是否科学 4分灼烧不彻底，最多扣3分接种环拿法不对，扣1分未灼烧4分 2 从试管中取样接入培养皿中试管中取菌（15分）
50分 3 试管口未灼烧，扣3分　 2 持塞手法不正确，扣2分 3 接种环未冷却，扣3分 4 塞塞子时未灼烧塞子与管口，扣4分 3 试管口离开无菌区，扣3分手法是否标准(5分) 1 持平板的手法不当扣1分 4 开口过大扣4分分区接种（30）
5 有离开5cm酒精灯无菌区1次扣2分，最多扣5分　离开无菌区10cm以上一次扣5分 5 划完1区未灼烧，扣5分 5 灼烧完未冷却，扣5分 5 单手旋转平板，有明显的分区操作 10 划破平板，最多扣10分 3 接种完毕，台面的处理以及培养等台面的整理：酒精灯熄灭，各试验器材归位（4分）
10分 1分熄灭方式不对，扣1分　　 3分未归位，扣3分；
未整理，扣2分未带走垃圾，扣2分。最多扣3分　置入培养箱中倒置培养，以及最适培养温度的设置（4分）
4分未倒置，扣2分　　培养温度和时间写在标签上，未注明扣2分完成实验，酒精棉球擦拭手或者洗手（2分）
2分未擦拭手或洗手 1 　　 4 结果检查分离效果 20分 10分 10个以上单菌落，少1个扣1分　　分区效果 5分无明显分区，只有一个区，扣5分平板无菌落区按占的比例扣分污染情况 5分有其他杂菌污染，扣5分 5 用时 5 　5分钟，超过1分钟扣1分　平板涂布分离考核标准（20min）
班级：
姓名：
学号：
项目考核内容分值考核记录（扣分）
备注得分准备 ( 10分) 物品摆放及酒精擦手 5 物品准备合适，不多不少，得3分物品摆放合理、酒精擦手正确，得2分摆放的物品影响操作，扣1分取菌前未用酒精擦手，扣1分编号（试管、培养皿），贴标签 5 都编号且正确，得5分每漏编（贴）一个，扣1分每错编一个，扣1分；
标签信息不全，一个扣1分样品稀释 (30分) 样品混匀(原始样品、稀释样品) 10 进行且操作正确（平摇样品瓶、手心震摇试管），得10分原始样品没有混匀，扣2分稀释样品没有混匀，一个扣2分手心震摇试管时没塞塞子，扣2分移液过程其他问题，一次扣2分吸管或移液器使用(打开方式、取液、调节液面、放液、稀释顺序) 10 吸管或移液器使用正确，得5分打开吸管包扎纸时手碰到管尖至吸管的1/3处，一次扣2分；
枪头盒每取一次都要迅速盖上，注意无菌操作，未盖一次扣2分放液时若吸管（或移液器）外壁碰到试管口却没有灼烧试管口，一次扣2分吸取刻度不准确，一次扣2分稀释时将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中，一次扣2分移液过程中液体流滴在试管外面，一次扣2分试管、三角瓶操作（开塞、管口灭菌、持法、盖塞）
10 试管三角瓶操作正确，得10分菌种试管三角瓶开塞未灼烧，扣2分开塞不正确，一次扣2分盖塞不正确，一次扣2分持法不正确，一次扣2分盖塞未灼烧，扣2分平板涂布（25分）
加样 5 操作正确，得5分将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中进行接种，一次扣1分吸管外壁碰到培养皿壁，一次扣1分漏接培养皿，一个扣1分试管被污染，每根扣1分涂布 10 涂布棒使用正确，涂布效果好，得10分涂布棒上酒精未灼烧彻底，扣2分涂布棒未冷却，一次扣2分涂布方法不对，扣2分涂布使平板破，扣4分单手持皿，平端，两指自如开合皿盖，错误扣2分酒精灯附近区操作 3 在酒精灯附近区操作，得3分未在酒精灯附近区操作，扣3分空白 4 进行，得4分未进行，一个扣2分操作熟练程度 3 熟练，得3分较熟练，得2分一般，得1分不熟练，得0分培养(3分）
培养 3 正确培养，得3分培养时未翻转培养皿，一个扣2分将培养时间与培养温度写在标签上，错误或漏写均扣1分文明操作 (2分) 实验后台面整理 1 整理，得1分未整理，扣1分器皿破损 1 未破损，得1分破损，扣1分完成时间 (0) 共用（　　　　　）分钟开始：　　　　　结束：　　　　　 0 提前，不加分不扣分按时，不加分不扣分超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）
合计结果观察结果判断（30分）
培养结果观察 10 菌落无片状，空白无菌落，得10分有10个以上单菌落，少一个扣1分空白平板有菌落，一个平板扣5分精密度极差与平均值之比(％) （以计数平板进行计算）
12 ≤10% 得12分 10~15% 得9分 15~20% 得6分 20~30% 得3分 >30% 得0分准确度（以计数平板进行计算）
8 ≤10% 得8分 10~20% 得4分 20~30% 得2分 >30% 得0分培养基的制备与灭菌班级：
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项目考核内容分值考核记录（扣分）
备注得分题目配制50mL牛肉膏蛋白胨培养基，全部分装入试管中，灭菌完毕摆斜面准备 ( 10分) 药品准备 2 药品齐全，类别准确天平准备 4 水平，干净其他 4 操作所需所有物品，均齐全合适计算（5分）
准确 5 所有物品均计算准确，且称量准确称量（25分）
加水 3 加水量适宜顺序准确 2 按照配方顺序加入样品方法正确 5 牛肉膏的称取方法正确 5 蛋白胨迅速，不至潮解操作文明 10 不得有药品撒入天平中，一次扣5分溶解与定容（10）
药品溶解 5 按顺序溶解样品，不糊不溢准确定容至要求的体积 5 体积准确，定容方法准确调节pH（10分）
调制要求值 5 pH试纸使用准确 5 调节准确，不过量，不回调分装（15分）
分装试管，将所有培养基分装完 5 装量适宜，过大或过小一支扣1分 5 分装时培养基沾染在试管口上，一支1分 5 分装过程培养基凝固灭菌（5分）
高压蒸汽灭菌 5 温度时间设定合适，写在标签上灭菌锅使用熟练摆斜面5分摆接种斜面 5 长短适宜表面整齐熟练程度（5分）
操作熟练程度 5 熟练，得5分较熟练，得3分一般，得2分不熟练，得0分文明操作 (5分) 实验后台面整理 3 整理，得3分未整理，扣3分器皿破损 2 未破损，得2分破损，扣2分完成时间 (5) 共用（　　　　　）分钟开始：　　　　　结束：　　　　　 0 提前，不加分不扣分按时，不加分不扣分超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）
合计高压蒸汽灭菌锅的使用与维护班级：
姓名：
学号：
序号内容分值评分标准扣分与备注得分 1 材料准备 5 所需菌种、材料齐全，中途无任务新增材料操作准备 5 水量适宜、物品摆放合适 10 加盖方式正确，各旋钮调节适当 2 灭菌 5 放气方法准确，时间恰当旋钮调节 15 灭菌过程中各旋钮调节准确压力旋钮 5 设置改变压力旋钮，方式准确 3 灭菌结束 5 灭菌结束，各旋钮和开关调节恰当，维护方法准确 4 故障处理 10 在灭菌过程中随机提出问题，

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